如何进行质粒DNA的分离，纯化和鉴定？（质粒dna）

提及如何进行质粒DNA的分离，纯化和鉴定？以及质粒dna的相关内容，许多人不太了解，来看看小章的介绍吧！

如何进行质粒DNA的分离，纯化和鉴定？

分离质粒时，可以将质粒去得很干净。方法为：先用TE之类的试剂将菌液悬浮起来，再用NaOH和SDS将菌液裂解（起裂解作用的主要是NaOH，但此时，SDS可以与蛋白很好的结合）。第三步，加入酸中合第二步中的碱，并且将SDS沉淀下来，同时，SDS和蛋白也一起沉淀下来，而基因组上面有很多的蛋白，这样基因组就一起沉淀下来，上清只有质粒了。上清的质粒用乙醇沉淀，这样得到的质粒基本没有基因组。而分离基因组时，一般也是用SDS裂解（想对于碱裂解，SDS比较温和）。同时还用蛋白酶K处理，将基因组上的蛋白降解掉，这样就得到了基因组DNA。再用乙醇沉淀，去掉其他的东东。如果菌中含有质粒，质粒也一起提出来，无法去掉。至于后来的试剂盒，如柱式，前其原理一样，不过最后一步纯度是用柱子的方法。

主要是在分离过程中起中和ph的作用

dna经过碱裂解（naoh）后，染色体dna氢键断裂，双螺旋解开，质粒dna氢键断裂，互补链不完全分离，再经过乙酸中和后成中性后者复性离心就可以达到分离的效果